- 秦鄂德,祝庆余,彭文明,姜涛,范宝昌,常国辉,于曼,司炳银,刘伯华,邓永强,刘洪,张雨
目的 :从患者尸解肺组织中直接扩增冠状病毒部分聚合酶基因序列 ,为重症急性呼吸综合征 (非典型肺炎 )的病原确认提供依据。方法 :采用RT_PCR方法 ,从非典型肺炎病例标本中进行冠状病毒聚合酶基因的扩增与序列测定。采用ClustalX1.8软件进行系统发生树分析。结果与结论 :从非典型肺炎病例尸解肺组织、传代发病小鼠肺组织及分离物感染的细胞培养物中 ,可分别扩增出冠状病毒的DNA片段。测序结果显示其核苷酸序列与目前已知冠状病毒的同源性在 6 0 %左右 ,而与加拿大和美国最近报道的新型冠状病毒的序列是一致的
2003年02期 81-83页 [查看摘要][在线阅读][下载 46k] - 徐新喜,刘亚军,谭树林,李若新
目的 :分析机动医疗方舱舱室温度场和气流速度场的分布状态并设计合理的舱室温度环境。方法 :运用计算流体动力学理论和有限元技术建立了模拟、预测舱室温度环境的数值仿真方法 ,通过试验对数值仿真结果进行了验证 ,运用空气调节工程理论和数值仿真方法设计了医疗方舱的舱室温度环境。结果 :舱室气流组织的运动形态和温度场、速度场的分布状态符合标准规定的要求。结论 :数值仿真方法合理可行 ,设计的医疗方舱舱室温度环境有利于提高舱室内人员的热舒适性和医疗作业的效果
2003年02期 84-88+162页 [查看摘要][在线阅读][下载 227k] - 方红,周新,叶平,贺艳丽,王琼,高月,刘永学
目的 :探讨过氧化物酶体增殖物激活型受体 (peroxisomeproliferator_activatedreceptors ,PPARs)激活剂对新生大鼠心肌细胞肿瘤坏死因子_α(tumornecrosisfactor_α ,TNFα)和PPARs自身表达水平的影响。方法 :体外原代培养新生Wistar大鼠心肌细胞 ,分别给予不同浓度的非诺贝特 (PPARα激活剂 )或吡格列酮 (PPARγ激活剂 )刺激 ,并辅加脂多糖诱导TNFα表达。采用半定量RT_PCR法检测TNFα ,PPARα及PPARγmRNA的表达 ,ELISA法检测TNFα的蛋白水平 ,Western印迹法检测PPARα和PPARγ蛋白表达。结果 :与对照组相比 ,非诺贝特组和吡格列酮组的TNFαmRNA及蛋白表达水平均明显降低 ,且呈剂量依赖性。而相应PPARα和PPARγ表达则无显著变化。结论 :PPARα和PPARγ激活剂可显著抑制新生大鼠心肌细胞中脂多糖诱导的TNFα表达 ,PPARα和PPARγ活化后发挥抗炎作用 ,但PPARα和PPARγ本身的表达水平可能并没有改变
2003年02期 89-91+95页 [查看摘要][在线阅读][下载 89k] - 杨光,刘玉,李少华,柳川,沈倍奋,邵宁生
目的 :研究金黄色葡萄球菌 (金葡菌 )毒素的调控机制 ,构建pET_trap表达载体 ,在大肠杆菌中表达金葡菌毒素调控的重要分子TRAP蛋白。方法 :从金葡菌中提取基因组DNA ,用特异引物钓取trap基因。通过亚克隆的方法构建了pET_trap表达载体 ,在大肠杆菌中诱导表达 ,经亲和柱层析分离纯化。制备纯化蛋白的多抗血清 ,利用Western印迹检测多抗与天然蛋白的反应。结果 :目的基因在大肠杆菌中获得高表达 ,超声破碎后 ,表达产物主要存在于上清中 ,制备的多抗血清可以与天然蛋白发生特异性反应。结论 :通过原核表达获得了天然的TRAP蛋白 ,为研究金葡菌毒素调控机制及防治金葡菌感染奠定了基础
2003年02期 92-95页 [查看摘要][在线阅读][下载 85k] - 绳纪坡,李赏,胡宝成
目的 :寻找肿瘤细胞特异性结合肽 ,为肿瘤诊断试剂及肿瘤药物的研制奠定基础。方法 :用培养的人源肿瘤细胞使裸鼠致瘤 ,将随机肽库从裸鼠的尾静脉注射到裸鼠体内 ,循环数分钟后取肿瘤组织及正常对照组织进行噬菌体筛选 ;经过 2～ 3轮体内筛选 ,获得在肿瘤组织中富集的肽段。结果与结论 :利用体内噬菌体展示技术 ,结合人源肿瘤细胞 (SMMC_772 1和PLA_80 1D)裸鼠致瘤模型 ,从随机十二肽库中成功地筛选到可以较高特异性地结合SMMC_772 1肿瘤细胞或肿瘤血管的噬菌体多肽 ,通过对噬菌体单克隆进行测序 ,初步确定了几种可能的多肽基序(motif)。
2003年02期 96-98+102页 [查看摘要][在线阅读][下载 51k] - 易绍琼,王岚,王华,彭虹,高杰英
目的 :研究Ty2 1a免疫相关新基因 (Ty2 1aimmunization_associatedgene ,TIG_310 )的原核表达、细胞和亚细胞定位及其在Ty2 1a免疫中的变化规律。方法 :采用PCR技术 ,扩增TIG_310可能的编码区 ,将其克隆至pQE30载体 ,在M15菌株中进行诱导表达 ;采用原位杂交技术对TIG_310基因的表达产物在肠黏膜组织进行细胞定位 ;将其亚克隆至绿色荧光蛋白表达载体pEGFP_N1,通过电击转染导入L细胞 ,确定其亚细胞定位 ;通过RT_PCR研究其在Ty2 1a免疫中的变化规律。结果与结论 :TIG_310的编码区在原核表达系统中获得包涵体表达 ;原位杂交结果显示该基因表达在肠黏膜的上皮细胞中 ;与绿色荧光蛋白融合表达的实验结果表明 ,该蛋白定位于整个细胞内。该基因在正常的BALB/c小鼠的胃肠黏膜高表达 ,在Ty2 1a第一次灌胃免疫后表达量显著增高 ,随着免疫次数的增加 ,TIG_310的表达量逐渐恢复正常
2003年02期 99-102页 [查看摘要][在线阅读][下载 82k] - 龚焱宏,刘秀文,朱宝珍,王丽萍
目的 :了解DNA疫苗在BALB/c小鼠体内的生物分布情况 ,建立DNA疫苗体内生物分布情况研究方法。方法 :乙肝核酸疫苗 (HBVDNA)经3 2 P标记、分离、纯化、鉴定后 ,胫前肌注射给药 ,结合三氯乙酸 (TCA)沉淀 ,研究肌注乙肝核酸疫苗后BALB/c小鼠体内的生物分布情况。结果 :质粒DNA疫苗除注射局部肌肉分布较多外 ,其他一些重要组织也有分布 ,其中腺体组织 (肾上腺、胰腺、胸腺 )中的浓度最高 ,其次为排泄物 (尿、肠内粪 ) ,脑组织中浓度最低。各组织中可沉淀放射性按血浆浓度时间曲线下面积 (AUC)从高到低排列依次为胸腺、肾上腺、膀胱、生殖腺、脂肪、肠内粪、胰腺、颌下腺、脾、小肠、眼球、肝、肠内容、肾、甲状腺、肺、淋巴结、对侧肌肉、心脏和脑。结论 :3 2 P标记DNA疫苗后各组织 β计数结合三氯乙酸沉淀法研究核酸疫苗生物分布情况 ,方法灵敏、可靠 ,易于分析
2003年02期 103-106+136页 [查看摘要][在线阅读][下载 103k] - 刘雪梅,曹国军,杨光,丁红梅,沈倍奋,邵宁生
目的 :筛选噬菌体2 9末端酶大亚基gp16特异结合RNA适体。方法 :采用SELEX技术 ,以微孔板为固定介质 ,在由 2 5个碱基组成的随机区的RNA文库中进行筛选。结果与结论 :经 9轮筛选获得与gp16特异结合的RNA适体 ,结合百分数从未经筛选的 14 .4 %增加到第 9轮的 37.8%。测序结果大致分为 5个家族。其二级结构多呈茎环或凸环结构。抑制性适体的筛选正在进行中。
2003年02期 107-109页 [查看摘要][在线阅读][下载 40k] - 阎瑾琦,凌世淦,宋晓国,张贺秋,陈坤,朱翠侠
目的 :在丙型肝炎病毒 (hepatitisCvirus,HCV)不同变异株中 ,筛选高保守的能涵盖多种MHC限制类型的T细胞表位 ,并构建重组表位抗原的原核表达质粒。方法 :检索文献并结合MHC限制型 ,从中遴选出功能明确的T细胞表位 ;利用Goldkey软件 ,建立HCV全长蛋白序列数据库 ;从中分别截取各个表位所在区段 ,对所选取的表位进行同源性比较 ;从中选取保守性强的部分表位 ,用化学法合成表位基因 ,插入原核表达载体pBVIL1中 ,构建多个融合表达质粒并在E .coli表达。结果 :从文献中获得HCV免疫优势性T细胞表位 18个 ,在由 5 5条全长HCV序列组成的数据库中进行比较 ,获得了大量有关表位保守性的信息 ,并进行了统计分析 ,所构建的 5个表达质粒pBVIL1_T1～T5经鉴定后 ,在大肠杆菌中均获得了高效表达。结论 :本研究有助于深入认识HCVT细胞表位的特性 ,为表位的筛选提供了方法学依据 ,所选取的表位及原核表达的重组蛋白 ,为HCV治疗性疫苗的实验研究提供了候选抗原。
2003年02期 110-114页 [查看摘要][在线阅读][下载 90k] - 刘泽澎,曹琼,高新,杨军,李素波,兰炯采,章扬培
目的 :观察α_半乳糖苷酶对猕猴类人B抗原的酶解效果及α_半乳糖苷酶酶解后的红细胞进行异种血型动物输血的安全性。方法 :用 10 0U/mlα_半乳糖苷酶酶解猕猴红细胞表面的类人B血型抗原 ,吸收放散法检测猕猴血型及α_半乳糖苷酶酶解后猕猴红细胞类人B血型抗原清除情况 ;同时检测酶解对红细胞结构与功能的影响 ;回输实验检测红细胞存活率以及观察酶解后红细胞的安全性。结果 :α_半乳糖苷酶可以清除猕猴红细胞表面类人B抗原 ,而不影响红细胞结构、功能及其在体内存活 ;α_半乳糖苷酶酶解的类人B型红细胞输给类人A型血的猕猴 ,未发生输血反应 ;受血猴的血液生化及尿液各项指标与输血前相比 ,无明显变化。结论 :α_半乳糖苷酶可以清除猕猴红细胞表面类人B抗原 ,酶解后的红细胞输给类人A型猕猴是安全的。
2003年02期 115-117+143页 [查看摘要][在线阅读][下载 57k] - 王水明,王德文,彭瑞云,高亚兵,陈浩宇,曹晓哲,崔雪梅,赵梅兰,李玉红
目的 :探讨不同场强的电磁脉冲辐射对睾丸结构的影响。方法 :二级昆明雄性小鼠 114只 ,随机分为辐射组和对照组。辐射组小鼠分别接受 8× 10 3 ,2× 10 4,6× 10 4V/m电磁脉冲 5次重复全身照射 ,于照射后 6h ,1d ,3d ,7d ,14d和 2 8d观察睾丸和附睾病理学改变。结果 :3种场强的电磁脉冲辐射均未引起小鼠肛温和阴囊皮肤温度的明显升高 ,但睾丸却发生显著的各级生精细胞水肿、坏死和脱落 ,曲细精管内成熟精子稀少和缺失 ;最敏感的靶细胞是精原细胞和精子细胞 ;周边部曲细精管病变最明显 ;病变的严重程度与场强的大小呈正相关。结论 :8× 10 3 ～ 6× 10 4V/m电磁脉冲 5次重复全身照射小鼠 ,可引起小鼠睾丸严重的非热效应性生精细胞结构损伤。
2003年02期 118-120页 [查看摘要][在线阅读][下载 77k] - 邓桦,王德文,曹晓哲,谷庆阳,刘杰,赵梅兰,彭瑞云,董波,王晓民
目的 :观察高功率微波 (highpowermicrowave ,HPM)对心肌细胞的影响及细胞内钙离子浓度的变化 ,探讨HPM对心肌细胞损伤的发生机制。方法 :以功率密度 95 0mW /cm2 的HPM辐照心肌细胞后 ,用荧光染料Fluo_3/AM负载 ,于激光扫描共聚焦显微镜下观察心肌细胞形态和 [Ca2 +]i的变化 ;用FITC_膜联蛋白 (annexin)V/PI双染色法 ,于流式细胞仪检测心肌细胞的坏死和凋亡。结果 :HPM辐照后 ,细胞内钙离子浓度明显降低 ,与对照组相比差异显著 (P <0 .0 1)。心肌细胞发生坏死和凋亡 ,与对照组相比差异显著 (P <0 .0 1)。结论 :HPM辐照可引起心肌细胞[Ca2 +]i明显降低 ,提示HPM辐照可引起心肌细胞膜的损伤 ,从而造成 [Ca2 +]i的大量漏出和细胞的死亡。
2003年02期 121-122+161页 [查看摘要][在线阅读][下载 48k] - 苏瑞斌,李锦,秦伯益
目的 :分析精胺及亚精胺对吗啡镇痛作用的影响 ,确定胍丁胺对吗啡镇痛作用的影响是否与合成精胺及亚精胺相关。方法 :在热辐射甩尾和热板测痛模型上分析精胺和亚精胺对吗啡镇痛作用的影响。结果 :在热辐射甩尾和热板测痛模型中 ,皮下注射 0 .5～ 5 0mg/kg的精胺或亚精胺均不显著影响吗啡的镇痛作用。结论 :胍丁胺增强吗啡镇痛作用与其合成精胺及亚精胺无关
2003年02期 123-124+157页 [查看摘要][在线阅读][下载 40k] - 叶江枫,戚好文,梁军,蒙育林,范风云,赵峰,赵一岭
目的 :探讨放射性胸膜炎的发病机制及氟伐他汀的防治作用。方法 :将 98只雌性SD大鼠分为正常对照组 ( 10只 ) ,单纯照射组 ( 38只 )和氟伐他汀防治组 ( 5 0只 )。防治组于照射前 1周每只每天按 2 0mg/kg氟伐他汀灌胃 ,直至活杀 ,其他组灌服等量生理盐水。单纯照射组与氟伐他汀防治组行直线加速器全胸部照射 ,剂量为单次2 0Gy。照射后 5 ,15 ,30 ,6 0d按 4 0mg/kg硫喷妥钠腹腔内注射 ,麻醉后剪开胸腔 ,有胸水者抽取胸水进行常规及生化检查 ,细菌培养 ,并取肺组织以甲醛溶液固定 ,作病理切片检查。数据采用 χ2 检验。结果 :88只大鼠在照射后31～ 6 0d ,2 7只发生放射性胸膜炎 ,总发生率为 30 .7%。其中单纯照射组发生率为 4 2 .1% ( 16 /38) ,氟伐他汀防治组发生率为 2 2 % ( 11/5 0 ) ,χ2 值为 4 .10。与单纯照射组相比 ,氟伐他汀防治组放射性胸膜炎明显减少 ,而且病理改变也较轻 (P <0 .0 5 )。结论 :放射性胸膜炎在放射性肺损伤的早期即可出现 ,氟伐他汀能有效防治放射性胸膜炎的发生与发展
2003年02期 125-127页 [查看摘要][在线阅读][下载 68k] - 高春记,张伯龙,姚善谦,楼方定,韩晓萍,刘海川,达万明
目的 :研究自体造血干细胞移植治疗血液系统恶性肿瘤过程中环孢素A(CSA)能否诱导移植物抗宿主病(GVHD) ,并确定其毒副反应。方法 :进行自体造血干细胞移植的 10例血液系统恶性肿瘤患者接受CSA静脉滴注1.5mg/ (kg·d) ,0～ 2 8d ,观察皮疹情况、有无腹泻及血清胆红素水平来判断GVHD的发生 ;同时观察移植后造血重建、感染、出血以及检测肝、肾功能来分析其治疗的毒副反应。结果 :2例次早期出现GVHD ,皮疹为 +和 + + ,出现时间分别为移植后 8和 17d ,持续时间较短 ( 4和 5d) ,外周血WBC计数分别为 0 .9× 10 9/L和 0 .2× 10 9/L ;6例次患者出现GVHD皮疹 ( 1例 + ,5例 + + ,不包括前述 2例次 )的时间为 30d( 2 2～ 4 4d) ,皮疹持续时间为 18d( 9～ 2 8d) ,外周血WBC计数为 1.4 5× 10 9/L[( 0 .4～ 2 .6 )× 10 9/L]。对移植后造血重建、感染、出血 ,以及肝、肾功能的影响不明显。结论 :CSA在自体造血干细胞移植过程中可以安全地诱导GVHD的发生 ,但其抗肿瘤效应的证据有待于进一步研究
2003年02期 128-130页 [查看摘要][在线阅读][下载 38k] - 李瑞兴,秦超,陈国良,程旭东,刘建
目的 :建立山地进攻战役减员的统计学模型 ,提供计算机模拟研究的基础。方法 :收集了我军某次战争某战役方向战役减员的经验数据 ,计算每日减员率 ,采用柯尔莫哥洛夫_斯米尔诺夫方法进行统计分布的拟合优度检验 ,运用博克斯_詹金斯方法建立时间序列模型。结果 :战役减员率分布符合伽玛分布 ,时间序列模型为ARIMA( 0 ,1,1)。结论 :时间序列模型能够较好地说明减员分布的统计学特征
2003年02期 131-133页 [查看摘要][在线阅读][下载 40k] - 徐野,周士波,赵东升,赵思清
目的 :基于JSP技术 ,构建军事医学科学院仪器设备管理系统 ,以Web方式实现军事医学科学院仪器设备的管理。方法 :以JSP技术为基础构建三层Web结构 ,采用page_viewwithbean的JSP体系结构 ,使用JDBC_ODBC桥接驱动程序连接SQLServer2 0 0 0数据库 ,实现仪器设备管理系统。结果与结论 :军事医学科学院仪器设备管理系统以Web方式通过网络管理军事医学科学院仪器设备 ,利于数据共享与交换 ,具有一定的实用价值
2003年02期 134-136页 [查看摘要][在线阅读][下载 35k] - 冯晓燕,凌世淦
丙型肝炎病毒的慢性感染是肝细胞癌发生的主要危险因素之一 ,核心蛋白在致癌过程中可能发挥了重要的作用。本文综述了近年来对丙型肝炎病毒核心蛋白特性及其相互作用蛋白的研究进展 ,尤其是针对核心蛋白与肝癌的发生和发展的关系作了较详细的探讨
2003年02期 137-140页 [查看摘要][在线阅读][下载 58k] - 鲍国强,章扬培
进行异种器官移植需要解决种间免疫排斥反应 (HAR ,DXR和TMR)及猪的内源性逆转录病毒 (PERV)的问题。基因工程及体细胞克隆猪的出现为克服异种器官移植中的障碍开辟了新的途径。本文对近年来的研究进展做一综述
2003年02期 141-143页 [查看摘要][在线阅读][下载 37k] - 王永安,周文霞,阮金秀
梭曼中毒 ,可导致惊厥。惊厥发生后 ,谷氨酸大量增多 ,从而使惊厥得以维持、延续并引起中枢神经系统病理学改变。谷氨酸拮抗剂 ,通过抑制突触前谷氨酸释放及作用于突触后谷氨酸的相应受体 ,发挥抗惊及神经保护作用。本文将对不同类型的谷氨酸拮抗剂抗梭曼致惊疗效、作用机制及应用前景作一简要介绍
2003年02期 144-146页 [查看摘要][在线阅读][下载 43k] - 李静,高峻钰
急性肾功能不全 (ARF)可单独由缺血和肾毒性损伤或联合作用引起。根据损伤的严重性不同 ,ARF可以引起肾小管细胞的凋亡或坏死。大量证据证明了凋亡在急性肾功能不全中的作用。胱冬肽酶是凋亡通路的介质之一 ,胱冬肽酶抑制剂改善了急性肾功能不全 ;凋亡通路为预防肾小管细胞凋亡提供了许多潜在的靶位
2003年02期 147-149页 [查看摘要][在线阅读][下载 40k] - 张宝林,王嘉玺
内皮抑制素是从小鼠内皮瘤细胞系EOMA的培养液中分离提取到的一种能特异性地抑制血管内皮细胞增殖和迁移的蛋白 ,其抑制血管内皮细胞增殖能力是已发现的血管抑制素的数倍。本文综述了内皮抑制素的发现及结构特点、内皮抑制素的生物学特性、作用机制 ,并对现存的问题和应用前景进行了分析和展望
2003年02期 150-153页 [查看摘要][在线阅读][下载 53k] - 郭梅,牟兆钦
如何快速、准确地诊断机会性真菌感染 ,特别是深部真菌感染一直是临床微生物实验室面临的难题之一。由于传统的真菌培养耗时长 ,敏感性低 ,血清学方法特异性和敏感性差 ,这就要求研究者改进和发展传统技术进行诊断 ,指导临床选择合适的抗真菌药物 ,及早治疗侵袭性真菌病。本文根据近年来的文献报道 ,对以念珠菌为主的实验室常规诊断方法的改进和发展作一概述
2003年02期 153-157页 [查看摘要][在线阅读][下载 69k] - 杨瑞馥
重症急性呼吸综合征 (SARS)在我国开始流行时称为非典型肺炎 ,关于其病原研究似乎初露端倪。虽然有发现副粘病毒和衣原体样颗粒的报道 ,但现有研究资料提示新型冠状病毒可能是主要致病元凶 ,其他病原在SARS中起什么作用仍有待研究。本文着重讨论病原的鉴定和可能的检测技术。
2003年02期 158-160页 [查看摘要][在线阅读][下载 35k] - 万红,原新茹,安海英,杨红军,王汉斌2003年02期 161页 [查看摘要][在线阅读][下载 11k]
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